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    elisa試劑盒

    人雌激素誘導蛋白(PS2)ELISA Kit
    產品簡介:英文名:Human Estrogen-induced protein pS2 ELISA Kit 相關類別:ELISA儲存條件:2-8℃產品編號:kt30112 貨號:69-30112
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    人雌激素誘導蛋白(PS2)酶聯免疫分析(ELISA)
    試劑盒使用說明書
    實驗原理:

    人雌激素誘導蛋白(PS2)試劑盒含量是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知待測物質濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將待測物質和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質的濃度呈比例關系。


    試劑盒組成:

    試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存
    說明書 1份 1份
    封板膜 2片(48) 2片(96)
    密封袋 1個 1個
    酶標包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
    標準品 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
    標準品稀釋液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存
    酶標試劑 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
    樣品稀釋液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
    顯色劑A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
    顯色劑B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
    終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
    濃縮洗滌液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶    2-8℃保存
    注:標準品用標準品稀釋液依次做倍比稀釋
    標本要求:
    1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
    2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
    操作步驟:
    1.加樣:標準品設定5個濃度點10個孔,每個濃度設定平行孔,加入50微升不同濃度的標準品,空白孔設定1個孔加入50微升蒸餾水(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔,在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
    2.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
    3.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
    4.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
    5.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
    6.溫育:操作同3。
    7.洗滌:操作同5。
    8.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
    9.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
    10.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
    注意事項
    1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
    2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
    3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
    4.請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
    5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
    6.底物請避光保存。
    7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
    8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
    9.本試劑不同批號組分不得混用。
    11.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
    計算:
    以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD
    值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標
    準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
    倍數,即為樣品的實際濃度。
    試劑盒性能:
    1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990以上。
    2.批內與批間應分別小于9%和11%
    保存條件及有效期:
    1.試劑盒保存:;2-8℃。
    2.有效期:6個月



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